一、引言

传染性造血器官坏死病（Infectious hematopoietic necrosis，IHN）是一种由传染性造血器官坏死病毒（Infectious hematopoietic necrosis virus，IHNV）引起的鱼类急性传染病，主要感染鲑科鱼类，可导致鱼类大量死亡，给水产养殖业带来严重的经济损失。为了及时、准确地诊断IHN，保障水产养殖业的健康发展，本文依据GB/T15805.2-2017《传染性造血器官坏死病诊断规程》，介绍了IHN的检测方法。

二、病毒分离与鉴定

1. 病毒分离

取患病鱼的肝脏、脾脏、肾脏等组织，用无菌生理盐水制成10%的组织匀浆，离心取上清液，接种于鲑科鱼类细胞系，如CHSE-214细胞、RTG-2细胞等，在28℃下培养，观察细胞病变。

2. 病毒鉴定

通过病毒的形态学观察、理化特性分析、血清学鉴定等方法，对分离得到的病毒进行鉴定。

三、核酸检测

1. 核酸提取

取患病鱼的组织或血液，用核酸提取试剂盒提取病毒核酸。

2. PCR扩增

以提取的病毒核酸为模板，进行PCR扩增。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，根据扩增产物的大小和特异性，判断是否感染IHN病毒。

四、血清学检测

1. 间接免疫荧光抗体试验

取患病鱼的组织或血液，制成冰冻切片，用IHNV阳性血清进行间接免疫荧光抗体试验，观察荧光反应。

2. 酶联免疫吸附试验

用IHNV抗原包被酶标板，加入患病鱼的血清，进行酶联免疫吸附试验，检测血清中的抗体水平。

五、结果判定

根据病毒分离与鉴定、核酸检测、血清学检测的结果，按照GB/T15805.2-2017《传染性造血器官坏死病诊断规程》的判定标准，判断是否感染IHN病毒。