一、引言

马鼻肺炎病毒（Equine rhinopneumonitis virus，简称ERP）是一种重要的人畜共患病原，可引起马属动物的呼吸道疾病和繁殖障碍。GB/T27621-2011《马鼻肺炎病毒PCR检测方法》是我国针对马鼻肺炎病毒检测的一项重要标准，为准确、快速检测马鼻肺炎病毒提供了科学依据。

二、检测原理

本标准采用聚合酶链式反应（PCR）技术，通过设计特异性引物，对马鼻肺炎病毒的核酸进行扩增，从而实现对病毒的检测。PCR技术具有高灵敏度、高特异性和快速等优点，能够在短时间内检测出微量的病毒核酸。

三、样本采集

样本采集是PCR检测的关键环节之一。根据马鼻肺炎病毒的感染特点，可采集马的鼻拭子、咽拭子、血液、精液、阴道分泌物等样本。采集样本时应注意无菌操作，避免样本受到污染。

四、检测步骤

1. 核酸提取：将采集的样本进行核酸提取，提取的核酸可用于后续的PCR扩增。

2. PCR扩增：将提取的核酸加入到PCR反应体系中，进行扩增反应。扩增反应体系包括特异性引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶、缓冲液等。扩增反应条件应根据实验要求进行优化。

3. 结果判定：扩增反应结束后，通过琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定量PCR等方法对扩增产物进行检测和分析。根据扩增产物的大小和荧光信号强度，判断样本中是否存在马鼻肺炎病毒核酸。

五、质量控制

为确保PCR检测结果的准确性和可靠性，应进行质量控制。质量控制包括阳性对照、阴性对照、重复性试验、交叉反应试验等。阳性对照和阴性对照应同时进行检测，以确保检测系统的有效性和特异性。重复性试验和交叉反应试验应定期进行，以评估检测方法的稳定性和可靠性。