一、引言

油菜茎基溃疡病菌是一种对油菜生产具有严重危害的病原菌。准确、快速地进行检疫鉴定对于防止该病菌的传播和扩散至关重要。GB/T31793-2015为油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定提供了科学、规范的方法。本文将详细介绍该标准的具体内容和检测流程。

二、检测原理

GB/T31793-2015规定了油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定的生物学和分子生物学方法。生物学方法主要基于病原菌的形态特征、培养特性和致病性等方面进行鉴定。分子生物学方法则利用特异性引物对病原菌的基因进行扩增和测序，以确定其种类。

三、样本采集与处理

采集具有典型症状的油菜植株样本，包括茎基部、叶片和果实等部位。将样本切成小块，放入无菌水中振荡清洗，去除表面的杂质和污染物。将样本转移至无菌培养皿中，用无菌滤纸吸干水分。

四、病原菌分离与培养

将处理后的样本接种到选择性培养基上，在适宜的温度和光照条件下培养。观察病原菌的生长情况，包括菌落形态、颜色、质地等特征。进行致病性测定，以验证分离得到的病原菌是否具有致病性。

五、分子生物学鉴定

提取病原菌的基因组DNA，利用特异性引物进行PCR扩增。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳图谱判断是否存在目标条带。如果存在目标条带，则进一步进行测序分析，以确定病原菌的种类。