一、引言

饲料中大肠菌群的测定是饲料质量检测的重要项目之一。大肠菌群是一群能在37℃、24小时内发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。它们广泛存在于人和动物的肠道中，是评价饲料卫生质量的重要指标之一。

二、检测原理

本检测方法依据GB/T18869-2002《饲料中大肠菌群的测定》。大肠菌群在乳糖胆盐发酵管中能发酵乳糖产酸产气，在伊红美蓝琼脂平板上能发酵乳糖产酸使伊红和美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有金属光泽。

三、检测步骤

1. 样品的采集与处理：按照相关标准采集饲料样品，并进行适当的处理，如粉碎、匀浆等。

2. 样品的稀释：将处理后的样品进行适当稀释，以获得合适的检测浓度。

3. 乳糖胆盐发酵管的培养：将稀释后的样品接种到乳糖胆盐发酵管中，在37℃下培养24小时。

4. 伊红美蓝琼脂平板的培养：将乳糖胆盐发酵管中的培养物接种到伊红美蓝琼脂平板上，在37℃下培养24小时。

5. 结果的观察与计数：观察伊红美蓝琼脂平板上的菌落形态，挑取紫黑色菌落进行革兰氏染色和镜检，确认是否为大肠菌群。计数平板上的大肠菌群菌落数，并根据稀释倍数计算样品中的大肠菌群数。

四、注意事项

1. 检测过程中应严格遵守无菌操作原则，避免交叉污染。

2. 乳糖胆盐发酵管和伊红美蓝琼脂平板应在有效期内使用。

3. 培养条件应严格控制，如温度、时间等。

4. 结果的判定应按照相关标准进行，避免误判。