检测介绍

体外哺乳动物细胞基因突变试验是评价受试物遗传毒性的一项体外试验，能够检测受试物是否会引起哺乳动物细胞DNA中碱基对的排列顺序发生变化，包括碱基置换突变和移码突变。省心测第三方实验室开展化学品哺乳动物细胞基因突变试验服务。

试验细胞

本试验有多种细胞类型可供选择，包括L5178Y亚群CHO AS52V79或TK6细胞。用于本试验的细胞类型对化学性致突变物应具有明确的敏感性，高的集落形成效率以及稳定的自发突变率，应检测细胞是否被支原体感染，若已被感染则不能使用。

试验原理

细胞在正常情况下，能产生HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶），在含有6-硫代鸟嘌呤（6-thioguanine,6-TG）的选择性培养液中，HGPRT催化产生核苷-5，-单磷酸（NMP），NMP掺入DNA中致细胞死亡。在致癌和（或）致突变物作用下，某些细胞X染色体上控制HGPRT的结构基因发生突变，不能再产生HGPRT， 从而使突变细胞对6-TG具有抗性作用，能够在含有6-TG的选择性培养液中存活生长。在有或无代谢活化系统的条件下，将细胞培养物暴露于受试物中适当时间，然后将细胞再传代培养，在含有6-TG的选择性培养液中，突变细胞会继续分裂并形成集落，计数突变集落形成数，计算突变频率，从而推断受试物的致突变性。

检测标准

GB/T 21793-2008 化学品 体外哺乳动物细胞基因突变试验方法
GBZ/T 240.10-2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第10部分:体外哺乳动物细胞基因突变试验
GB/T 15670.20-2017 农药登记毒理学试验方法 第20部分:体外哺乳动物细胞基因突变试验