项目介绍

细胞ROS（活性氧种）检测是一种用于测定细胞内活性氧种含量的实验方法。活性氧种是细胞代谢过程中产生的一类化学性质活泼的含氧分子，包括超氧阴离子（O2-）、过氧化氢（H2O2）、羟基自由基（·OH）等。它们在细胞信号传导、免疫反应等生理过程中发挥重要作用，但过量时会导致细胞损伤、DNA突变，甚至细胞死亡。

以下是细胞ROS检测的一些常用方法：

1. 化学荧光探针法

Dihydroethidium (DHE)：可以穿透细胞膜，被超氧阴离子氧化后产生红色荧光。

2’,7’-Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA)：进入细胞后，被ROS氧化成2’,7’-dichlorofluorescein (DCF)，在荧光显微镜下呈现绿色荧光。

Hydroethidine (HE)：类似DHE，用于检测超氧阴离子。

2. 电子自旋共振（ESR）光谱法

通过检测样品中的自由基含量来间接评估ROS的水平。此方法需要专门的设备和专业知识。

3. 酶联免疫吸附试验（ELISA）

使用特定的抗体检测细胞提取物中的ROS相关代谢产物。

4. 高效液相色谱（HPLC）或气相色谱-质谱（GC-MS）

这些方法可以定量分析细胞内ROS相关的化学物质。

细胞ROS检测的基本步骤：

1. 细胞培养：在适当的条件下培养细胞至所需密度。

2. 处理细胞：如果实验设计需要，可以使用某些试剂或条件处理细胞以诱导ROS的产生。

3. 加载探针：将ROS特异性荧光探针加入细胞培养液中，按照说明书进行操作。

4. 孵育：在适当条件下孵育细胞，使探针进入细胞并与ROS反应。

5. 洗涤：去除未进入细胞的探针。

6. 检测：使用荧光显微镜或荧光分光光度计检测荧光信号。

7. 数据分析：分析荧光强度，以评估细胞内ROS的水平。

注意事项：

1. 确保实验过程中避免光照和氧化的影响，因为这些因素可能改变ROS的浓度。

2. 使用适当的阳性对照和阴性对照来验证实验的有效性。

3. 考虑到不同的ROS探针可能对不同类型的ROS有选择性，选择合适的探针非常重要。

4. 细胞ROS检测在研究氧化应激、细胞凋亡、炎症和许多疾病的发生机制中具有重要作用。

提供信息

1. 客户是否提供细胞，流式检测尽量活细胞，免疫荧光检测也需活细胞；

2. 需要流式检测还是免疫荧光检测；

3. 对流式结果分析是否有需求。

客户案例

荧光显微镜观察ROS水平

流式细胞仪观察ROS水平