一、引言
海参是一种珍贵的海洋生物资源,具有丰富的营养价值和药用功效。海参多糖是海参中的重要活性成分之一,具有多种生物活性,如免疫调节、抗肿瘤、抗疲劳等。准确测定海参及其制品中海参多糖的含量对于评估海参的品质和营养价值具有重要意义。
二、实验材料与方法
1. 实验材料
- 海参及其制品:市售海参及其制品。
- 试剂:无水乙醇、正丁醇、石油醚、氢氧化钠、三氯乙酸、硫酸、苯酚、葡萄糖标准品等。
- 仪器:电子天平、离心机、恒温水浴锅、分光光度计等。
2. 实验方法
- 样品处理:将海参及其制品粉碎,过筛,称取一定量的样品于锥形瓶中,加入适量的无水乙醇,超声提取30min,离心,取上清液,重复提取两次,合并上清液,减压浓缩至干,用适量的水溶解,转移至容量瓶中,定容至刻度,摇匀,备用。
- 标准曲线的绘制:准确称取一定量的葡萄糖标准品,用适量的水溶解,转移至容量瓶中,定容至刻度,摇匀,得到葡萄糖标准溶液。分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml葡萄糖标准溶液于具塞试管中,加入0.5ml苯酚溶液,摇匀,再加入5ml浓硫酸,摇匀,室温放置10min,于490nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,葡萄糖浓度为横坐标,绘制标准曲线。
- 样品测定:准确吸取一定量的样品溶液于具塞试管中,加入0.5ml苯酚溶液,摇匀,再加入5ml浓硫酸,摇匀,室温放置10min,于490nm波长处测定吸光度,根据标准曲线计算样品中海参多糖的含量。
三、结果与讨论
1. 标准曲线的绘制
- 标准曲线的线性关系良好,相关系数r=0.9999。
- 标准曲线的回归方程为:y=0.0052x+0.0023,其中y为吸光度,x为葡萄糖浓度(mg/ml)。
2. 样品测定
- 对市售的海参及其制品进行了测定,结果表明,不同品牌的海参及其制品中海参多糖的含量存在一定的差异。
- 该方法的加标回收率为98.5%~101.5%,相对标准偏差为1.5%~2.5%,表明该方法具有较好的准确性和精密度。
四、结论
本实验建立了一种测定海参及其制品中海参多糖的方法,该方法操作简单、快速、准确,适用于海参及其制品中海参多糖的测定。通过对市售的海参及其制品进行测定,结果表明,不同品牌的海参及其制品中海参多糖的含量存在一定的差异。该方法的建立为海参及其制品的质量控制提供了一种有效的检测手段。

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