一、引言

马铃薯是全球重要的粮食作物之一，其产量和质量受到多种病毒的影响。马铃薯M病毒（Potato mop-top virus，PSTMV）是一种重要的马铃薯病毒，可引起马铃薯植株矮化、叶片卷曲、坏死等症状，严重影响马铃薯的产量和品质。准确、快速地检测马铃薯M病毒对于马铃薯的检疫和防控具有重要意义。

二、检测原理

GB/T36846-2018《马铃薯M病毒检疫鉴定方法》规定了马铃薯M病毒的检疫鉴定方法，包括血清学检测和分子生物学检测。血清学检测主要采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法，利用马铃薯M病毒的特异性抗体与样品中的病毒抗原结合，通过酶标记的二抗与抗体-抗原复合物结合，加入底物显色，根据颜色深浅判断样品中是否含有马铃薯M病毒。分子生物学检测主要采用聚合酶链式反应（PCR）法，利用马铃薯M病毒的特异性引物对样品中的病毒核酸进行扩增，通过琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定量PCR技术检测扩增产物，判断样品中是否含有马铃薯M病毒。

三、检测步骤

1. 样品采集：采集马铃薯植株的叶片、茎尖、块茎等组织作为检测样品。

2. 样品处理：将采集的样品洗净、晾干，切成小块，加入适量的提取缓冲液，匀浆后离心，取上清液作为检测样品。

3. 血清学检测：将检测样品加入ELISA板孔中，加入马铃薯M病毒的特异性抗体，孵育后加入酶标记的二抗，孵育后加入底物显色，根据颜色深浅判断样品中是否含有马铃薯M病毒。

4. 分子生物学检测：将检测样品加入PCR反应管中，加入马铃薯M病毒的特异性引物，进行PCR扩增，扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定量PCR技术检测，判断样品中是否含有马铃薯M病毒。

四、结果判定

1. 血清学检测：根据ELISA板孔的颜色深浅，按照试剂盒说明书的判定标准判断样品中是否含有马铃薯M病毒。

2. 分子生物学检测：根据琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定量PCR技术检测的扩增产物大小和数量，判断样品中是否含有马铃薯M病毒。

五、注意事项

1. 样品采集：采集样品时应选择具有代表性的植株和组织，避免采集受污染的样品。

2. 样品处理：样品处理过程中应注意避免病毒的污染和降解，确保检测结果的准确性。

3. 检测试剂：检测试剂应按照说明书的要求保存和使用，避免试剂的失效和污染。

4. 检测人员：检测人员应具备专业的知识和技能，严格按照操作规程进行检测，确保检测结果的准确性和可靠性。

六、结论

GB/T36846-2018《马铃薯M病毒检疫鉴定方法》是一种准确、快速、可靠的马铃薯M病毒检疫鉴定方法，可用于马铃薯的检疫和防控。在实际应用中，应严格按照操作规程进行检测，确保检测结果的准确性和可靠性。应加强对马铃薯M病毒的监测和防控，减少病毒的传播和危害。