一、引言

银耳作为一种常见的食用菌，具有丰富的营养价值和保健功效。银耳多糖是银耳中的重要活性成分之一，具有多种生理功能。准确测定银耳中银耳多糖的含量对于评估银耳的品质和营养价值具有重要意义。本文将依据GB/T45733-2025《银耳中银耳多糖的测定方法》，对银耳中银耳多糖的测定方法进行详细解析。

二、实验材料与仪器

（一）实验材料

银耳样品：选择市售的银耳作为实验材料，确保样品的代表性和均匀性。

（二）实验仪器

电子天平：用于准确称量实验材料和试剂。

离心机：用于分离银耳多糖提取液中的杂质。

旋转蒸发仪：用于浓缩银耳多糖提取液。

高效液相色谱仪：用于分离和测定银耳多糖的含量。

三、实验步骤

（一）样品处理

将银耳样品洗净，晾干，粉碎，过筛，得到银耳粉末。准确称取一定量的银耳粉末，放入锥形瓶中，加入适量的蒸馏水，超声处理30分钟，使银耳多糖充分溶解。将锥形瓶放入离心机中，离心10分钟，分离上清液，得到银耳多糖提取液。

（二）标准曲线的绘制

准确称取一定量的葡萄糖标准品，放入容量瓶中，用蒸馏水溶解并定容，得到葡萄糖标准溶液。分别吸取不同体积的葡萄糖标准溶液，放入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液。分别吸取不同浓度的葡萄糖标准溶液，注入高效液相色谱仪中，进行色谱分析，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液的峰面积。以葡萄糖浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

（三）样品测定

准确吸取一定量的银耳多糖提取液，注入高效液相色谱仪中，进行色谱分析，得到银耳多糖提取液的峰面积。根据标准曲线，计算出银耳多糖提取液中银耳多糖的含量。

四、结果与讨论

（一）标准曲线的线性关系

通过对不同浓度的葡萄糖标准溶液进行色谱分析，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液的峰面积。以葡萄糖浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明，标准曲线的线性关系良好，相关系数R²大于0.999。

（二）样品测定结果的重复性

对同一银耳样品进行多次测定，得到不同测定结果的相对标准偏差（RSD）。结果表明，样品测定结果的重复性良好，RSD小于2%。

（三）方法的回收率

向银耳样品中加入一定量的葡萄糖标准品，然后按照实验步骤进行测定，得到银耳样品中银耳多糖的含量和加入的葡萄糖标准品的含量。根据加入的葡萄糖标准品的含量和测定得到的银耳样品中银耳多糖的含量，计算出方法的回收率。结果表明，方法的回收率在95%~105%之间，符合GB/T45733-2025的要求。

五、结论

本文依据GB/T45733-2025《银耳中银耳多糖的测定方法》，对银耳中银耳多糖的测定方法进行了详细解析。该方法操作简单，重复性好，回收率高，适用于银耳中银耳多糖的测定。