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环境微生物功能基因的定量检测

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检测项目:

2、特异性强:实验完成后,溶解曲线的分析可以验证扩增产物的特异性,降低假阳性。3、精确定量:利用扩增进入指数增长期的CT值来定量测定起始模板量,从而实现了极为精确的核酸定量检测。可以十分方便的知道目的基因的含量。2.绝对量计算 公式(copies/µl)=[质粒浓度(ng/ul)......

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第三方检测机构

  2、特异性强:实验完成后,溶解曲线的分析可以验证扩增产物的特异性,降低假阳性。

  3、精确定量:利用扩增进入指数增长期的CT值来定量测定起始模板量,从而实现了极为精确的核酸定量检测。可以十分方便的知道目的基因的含量。

2. 绝对量计算

 公式(copies/µl)=[质粒浓度(ng/ul)×10-9×6.02×1023] / [ 克隆产物碱基数×660(g/mol)]

 载体(pMD 18-T)碱基数 = 2692 bp

3. 对于有生物学重复的检测,计算SD和p-value。

 

  1. 总DNA;样品浓度:≥10 ng/ul;样品总量:>1ug;样品纯度: OD260/280为1.8~2.2,OD260/230≥1.0,260nm处有正常峰值。RNA完整性: 电泳检测28S/18S≥1.5。

  2. 组织:样品取样后立即液氮速冻,保存于液氮或超低温冰箱中。请尽量使用新制备的样品且样品量至少满足3次以上提取;

 

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