犬瘟热病毒灭活检测项介绍

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犬瘟热病毒灭活检测对象：

3%甲醛、乙醚、三氯甲烷、3％烧碱、季铵盐消毒液、来苏尔等

水貂犬瘟热、细小病毒性肠炎二联灭活疫苗制备及其质量评价

本研究制备了水貂犬瘟热、细小病毒性肠炎二联灭活疫苗3批，通过病毒液检验、半成品检验及成品检验，显示所生产的灭活疫苗工艺稳定，批间差异小，成品接种水貂安全无副反应；采用血清抗体测定和免疫攻毒方法对3批灭活二联苗进行免疫效果研究，结果显示，免疫接种21 d，水貂犬瘟热中和抗体可达1:51～1:91，水貂细小病毒HI抗体可达1:64～1:256，经免疫攻毒，可抵抗100 ID50的犬瘟热强毒和水貂细小病毒强毒的攻击，具有较好的免疫效果。

水貂犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗的方法，其特征在于包括以下步骤:

(1)将所述的水貂细小病毒弱毒株MEVB-F61接种在猫肾细胞F81或CRFK上进行病毒扩增培养，每日观察细胞病毒情况，待细胞病变达到80%左右时即可通过反复冻融的方法收获病毒液，并进行病毒滴度(TCID5(i ^ 106_5)、纯净性检验，将检验合格的病毒液保存于-20。

[(2)水貂犬瘟热病毒弱毒疫苗株CDV3-CL接种于非洲绿猴肾细胞Veix)上进行病毒扩增培养，每日观察细胞病毒情况，待细胞病变达到80%左右时通过反复冻融的方法收获病毒液，并进行病毒滴度(TCID5(i> 105_°)、纯粹性检验，将检验合格的病毒液保存于-20°C;

(3)将步骤(1)和(2)收获的病毒液混合均匀，加入冻干保护剂混合，定量分装于无菌的安瓶内，加盖置于冻干机内预冻、干燥，即得。

在本发明所述的方法中，优选的，疫苗成品中犬瘟热病毒滴度> 104 7头份，水貂细小病毒滴度彡105.5/头份。

进一步的，本发明还提出了所述的水貂犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗在制备预防水貂犬瘟热和细小病毒性肠炎药物中的应用。

本发明的二联苗经安全性试验结果表明，经过单剂量(犬瘟热病毒滴度> 104_°/头份，水貂细小病毒滴度> 105.5/头份)、单剂量重复和10倍剂量接种水貂，体温、食欲、精神状态等生理指标均表现正常，无任何临床症状，剖检观察水貂主要脏器均无病变，证明水貂犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗对水貂安全；

效力试验表明，单剂量接种疫苗后，可保护水貂免于犬瘟热病毒、细小病毒检验用强毒的攻击，有效预防水貂犬瘟热、细小病毒性肠炎的发生。一次免疫接种3周、3个月后，水貂对犬瘟热病毒、细小病毒的保护率均为100% ;—次免疫接种6个月后，水貂对犬瘟热病毒、细小病毒的保护率均为95% ;—次免疫接种9个月后，水貂对犬瘟热病毒、细小病毒的保护率分别为85%和90%。疫苗的免疫期定为6个月。-8?_10°C的保存期定为12个月，-15?_20°C疫苗的保存期为15个月。

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