一、引言

致病性嗜水气单胞菌是一种常见的水产养殖病原菌，可引起鱼类、两栖类等水生动物的败血症、烂鳃病等疾病，给水产养殖业带来了巨大的经济损失。准确、快速地检测致病性嗜水气单胞菌对于水产养殖的健康发展至关重要。本文将根据GB/T18652-2025《致病性嗜水气单胞菌检验方法》，对致病性嗜水气单胞菌的检验方法进行详细解析。

二、检验材料

根据GB/T18652-2025标准，检验致病性嗜水气单胞菌需要准备以下材料：

1. 培养基：营养琼脂培养基、TCBS琼脂培养基、血琼脂培养基等。

2. 试剂：革兰氏染色液、生化鉴定试剂、PCR扩增试剂等。

3. 仪器设备：显微镜、培养箱、离心机、PCR扩增仪等。

三、检验步骤

1. 样品采集：从患病水生动物的肝脏、肾脏、脾脏等组织中采集样品，或将病死水生动物的尸体作为样品。

2. 样品处理：将采集的样品进行匀浆处理，制成10%的组织匀浆。

3. 增菌培养：将组织匀浆接种到营养琼脂培养基或TCBS琼脂培养基上，在35℃培养24小时。

4. 分离培养：将增菌培养后的样品接种到血琼脂培养基上，在35℃培养24小时。

5. 形态学观察：对分离培养后的菌落进行革兰氏染色，观察其形态学特征。

6. 生化鉴定：对分离培养后的菌落进行生化鉴定，确定其是否为致病性嗜水气单胞菌。

7. PCR鉴定：对分离培养后的菌落进行PCR鉴定，确定其是否为致病性嗜水气单胞菌。

四、结果判定

根据GB/T18652-2025标准，致病性嗜水气单胞菌的检验结果判定如下：

1. 形态学观察：致病性嗜水气单胞菌为革兰氏阴性短杆菌，呈两极浓染，无芽孢，有鞭毛。

2. 生化鉴定：致病性嗜水气单胞菌能够发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇等糖类，不发酵乳糖，能够产生吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐利用等生化反应。

3. PCR鉴定：致病性嗜水气单胞菌的16S rRNA基因序列具有特异性，通过PCR扩增可以特异性地检测致病性嗜水气单胞菌。

一、引言

致病性嗜水气单胞菌是一种常见的水产养殖病原菌，可引起鱼类、两栖类等水生动物的败血症、烂鳃病等疾病，给水产养殖业带来了巨大的经济损失。准确、快速地检测致病性嗜水气单胞菌对于水产养殖的健康发展至关重要。本文将根据GB/T18652-2025《致病性嗜水气单胞菌检验方法》，对致病性嗜水气单胞菌的检验方法进行详细解析。

二、检验材料

根据GB/T18652-2025标准，检验致病性嗜水气单胞菌需要准备以下材料：

1. 培养基：营养琼脂培养基、TCBS琼脂培养基、血琼脂培养基等。

2. 试剂：革兰氏染色液、生化鉴定试剂、PCR扩增试剂等。

3. 仪器设备：显微镜、培养箱、离心机、PCR扩增仪等。

三、检验步骤

1. 样品采集：从患病水生动物的肝脏、肾脏、脾脏等组织中采集样品，或将病死水生动物的尸体作为样品。

2. 样品处理：将采集的样品进行匀浆处理，制成10%的组织匀浆。

3. 增菌培养：将组织匀浆接种到营养琼脂培养基或TCBS琼脂培养基上，在35℃培养24小时。

4. 分离培养：将增菌培养后的样品接种到血琼脂培养基上，在35℃培养24小时。

5. 形态学观察：对分离培养后的菌落进行革兰氏染色，观察其形态学特征。

6. 生化鉴定：对分离培养后的菌落进行生化鉴定，确定其是否为致病性嗜水气单胞菌。

7. PCR鉴定：对分离培养后的菌落进行PCR鉴定，确定其是否为致病性嗜水气单胞菌。

四、结果判定

根据GB/T18652-2025标准，致病性嗜水气单胞菌的检验结果判定如下：

1. 形态学观察：致病性嗜水气单胞菌为革兰氏阴性短杆菌，呈两极浓染，无芽孢，有鞭毛。

2. 生化鉴定：致病性嗜水气单胞菌能够发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇等糖类，不发酵乳糖，能够产生吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐利用等生化反应。

3. PCR鉴定：致病性嗜水气单胞菌的16S rRNA基因序列具有特异性，通过PCR扩增可以特异性地检测致病性嗜水气单胞菌。